Cara Pewarnaan Gram di laboratorium

Pewarnaan Gram

a) Pengertian

Pewarnaan gram merupakan pewarnaan diferensial yang sangat berguna dan paling banyak digunakan di laboratorium. Pewarnaan ini merupakan tahap penting dalam pencirian dan identifikasi bakteri.

b) Metode

Mikroskopik

c) Tujuan

Untuk membedakan bakteri gram positif dan gram negatif

d) Prinsip Kerja
Dengan pewarnaan gram dapat di bedakan antara bakteri gram positif dan bakteri gram negatif, bakteri gram positif berwarna ungu karena menyerap warna pertama yakni carbol gentian violet dan tidak terlepas pada saat dilunturkan karena lapisan peptidoglikannya yang tebal. Sedangkan bakteri gram negatif akan berwarna merah karena menyerap warna kedua yakni air fuchsinkarena lapisan peptidoglikannya yang tipis maka mudah melepas zat warna pertama sasat di lunturkan dengan alkohol 96%.

e) Prosedur Kerja

I. Pra Analitik

a. Alat

1) Objek glass

2) Ose

3) Lampu spirtus

4) Botol semprot

5) Pipet tetes

6) Rak pewarnaan

7) Mikroskop

b. Bahan

1) Koloni bakteri

2) Larutan carbol gentian violet

3) Alkohol 96%

4) Larutan lugol

5) Air fuchsin

6) Nacl 0,9%

7) Oil emmersi

II. Analitik

Cara Kerja

1) Di pijarkan ose dan didinginkan kembali

2) Di ambil satu koloni bakteri dan di taruh di atas objek glass yang sbelumnya telah di tetesi dengan Nacl 0,9% satu tetes dan di buat sediaan

3) Di fiksasi dan didinginkan

4) Sediaan yang telah di fiksasi dan sudah dingin di warnai dengan larutan Carbol gentian Violet selama 1-3 menit

5) Di buang kelebiahan carbol gentian violet lalu digenangi dengan larutan lugol hingga menutupi semua sediaan dan di biarkan selama 45 detik hingga 1 menit

6) Di lunturkan dengan alkohol 96% selama 30 detik sampai 1 menit

7) Di bilas dengan air mengalir

8) Di genangi sediaan dengan air fuchsindan di biarkan selama 1 menit

9) Di bilas dengan air mengalir dan di keringkan

10) Di amati di bawah mikroskop dengan pembesaran objektif 100x dan di tetesi satu tetes oil immersi

III. Pasca Analitik

Interpretasi Hasil

Positif : bakteri gram positif berwarna ungu bakteri gram negatif berwarna merah 

Negatif : tidak di temukan adanya bakteri https://analiskesehatan01.blogspot.com/2018/01/pewarnaan-gram.html