Kultur E.coli Pada Makanan

  Kultur E.coli Pada Makanan 

a)    Pengertian

Suspensi mikroba digoreskan pada agar lempengan, agar miring atau media cair. Sifat biakan dari suatu mikroorganisme tergantung pada penampilannya pada berbagai media.

b)    Metode

Teknik penggoresan agar

c)    Tujuan

Untuk mengisolasi dan mengidentifikasi bakteri pada sampel makanan.

d)    Prosedur Kerja

I.      Pra Analitik

a.    Alat           

1)    Stomacher

2)    Inkubator

3)    Ose

4)    Nal

5)    Lampu spirtus

b.    Bahan 

1)    Media E.coli broth

2)    Media endo agar

3)    Media  KIA

4)    Media Tes Biokimia

5)    Aquades steril

6)    Sampel makanan

II.    Analitik

Cara  Kerja

a.    Hari pertama

1)    Di timbang 10 gr sampel dan di tambahkan dengan aquadest steril sebanyak 90 ml.

2)    Di haluskan dengan stomacher

3)    Di ambil 1 ml sampel dan di masukkan kedalam media E.coli broth

4)    Di inkubasi pada suhu 37^o C selama 24 jam

b.    Hari ke dua

1)    Di amati pertumbuahan bakteri pada media E.coli broth

2)    Di ambil koloni bakteri dengan menggunakan ose yang telah di sterilkan dengan di perantarai oleh lampu spirtus lalu di tanam pada media endo agar

3)    Di inkubasi pada suhu 37^o C selama 24 jam

c.    Hari ke tiga

1)    Di amati pertumbuhan koloni pada media endo agar

2)    Di ambil koloni bakteri dengan menggunakan ose yang telah di sterilkan dengan di perantarai oleh lampu spirtus dan di buat sediaan untuk pwarnaan gram

3)    Di ambil koloni bakteri dengan menggunakan ose dan nal  yang telah di sterilkan dengan di perantarai oleh lampu spirtus lalu di tanam pada media KIA

4)    Di inkubasi pada suhu 37^o C selama 24 jam

d.    Hari ke empat

1)    Diamati reaksi yang terjadi pada media KIA

2)    Di ambil koloni bakteri dengan menggunakan ose   yang telah di sterilkan dengan di perantarai oleh lampu spirtus lalu di tanam pada media MIO, MR/VP, Simon Citrat dan fermentasi gula – gula (glukosa, sukrosa, laktosa, maltosa dan mannitol) untuk uji Biokimia

3)    Di inkubasi pada suhu 37^o C selama 24 jam

e.    Hari ke lima

1)    Di lakukan pembacaan hasil penanaman pada media MIO, MR/VP, Simon Citrat dan fermentasi gula – gula (glukosa, sukrosa, laktosa, maltosa dan mannitol)

2)    Di cocokkan dengan tabel uji Biokimia

III.   Pasca Analitik

Interpretasi Hasil

a.    Hasil penanaman pada media:

1)    E.coli Broth      : Cairan keruh

2)    Ciri koloni pada media endo agar

Warna               : merah metalik

Koloni               : kecil – besar

Permukaan      : cembung berlendir

Pinggir              : rata

3)    Ciri pada media KIA

Dasar                : kuning/acid

Lereng              : kuning/acid

Gas                    : positif

H₂s                     : negatif

4)    Ciri  pada media MIO

Keruh pada bekas penusukkan, warna merah setelah penambahan reagen KOVAKS

5)    Ciri pada media MR

Berwarna merah setelah penambahan metil red 0,02%

6)    Ciri pada media VP

Tidak terjadi perubahan warna setelah penambahan KOH 40 % alfa-naptol dalam alkohol 5%

7)    Ciri pada media cimmon citrate : Berwarna hijau

8)    Ciri pada media gula –gula:

Glukosa              : media berubah warna menjadi kuning

Laktosa   : media berubah warna menjadi kuning

Sukrosa  : media berubah warna menjadi kuning

Maltosa   : media berubah warna menjadi kuning

Mannitol  : media berubah warna menjadi kuning

b.    Kesimpulan

Dari hasil kultur dapat di simpulkan bakteri yang terdapat pada sampel makanan adalah E.coli.

 

 https://analiskesehatan01.blogspot.com/2018/01/kultur-ecoli-pada-makanan.html